等度液相色谱分析仪是一种常用的液相色谱分析仪器，其工作原理是基于不同物质在固定相和流动相之间的分配系数不同而实现分离的。在分离过程中，流动相携带样品通过色谱柱，样品中的各组分在色谱柱上发生吸附、解吸、扩散等过程，从而实现分离。分离后的组分依次进入检测器，检测器将其转化为电信号，最后由数据处理系统进行处理和分析。

　　等度液相色谱分析仪主要由输液泵、检测器、色谱柱、进样系统以及数据处理系统等部分组成。其中，输液泵负责提供稳定、精确的流动相；检测器用于检测样品组分；色谱柱则是分离样品的关键部件；进样系统负责将样品注入色谱柱；数据处理系统则负责收集、处理和分析检测数据。

　　等度液相色谱分析仪的操作步骤如下：

　　1、准备工作：

　　检查仪器状态，确保所有连接管路的连接紧固，检查进样器、检测器和泵的工作情况。确保试剂瓶中有足够的溶剂，并检查柱温箱和样品转移系统的温度设定。

　　始终保持高效液相色谱仪器包括内在系统的清洁。室内温度始终保持恒定，因为室温的变化对高效液相色谱检测器有影响。

　　2、流动相准备：

　　将已经过滤并脱气的流动相注入储液罐。用流动相冲洗金属过滤器，然后将过滤器浸入储液罐的流动相中。

　　将储液罐放置在一定的高度，以避免由于搬运和其他操作人员的移动而造成不必要的跌落。

　　3、启动仪器：

　　按以下顺序依次启动高效液相色谱仪：泵→检测器→高效液相色谱软件→按预先计划的方法设置软件参数，如分析时间、检测波长、流速等。

　　4、系统排气与基线稳定：

　　启动泵，运行5分钟，主要是为了排除系统中的气泡，结束后关闭所有排气阀。然后按照预先计划的速度，以固定的速率（如1mL/min左右）运行流动相，走基线，直到基线平稳，就可以在计算机软件上进行监视。

　　5、样品准备：

　　根据实验目的，准备好待分析的样品。样品准备包括样品提取和预处理。提取要求根据分析物的特性选择适当的方法，如溶剂萃取、固相萃取等。预处理包括滤过、稀释、调整pH等步骤，确保样品符合分析要求。

　　6、进样：

　　在进样之前，需要通过洗涤进样针和管道以去除前一个样品的残留物。进样体积和进样速度根据样品的浓度和分析需要进行设定。

　　7、参数设置与进样分析：

　　基线平稳后，在软件中设置样品的运行参数，如流速和分析时间等。分析时间会因样品、流速、柱长等因素变化。

　　参数设置完毕后，将固定体积的样品溶液注入进样阀，然后在软件中启动注入命令，进样器中的样品溶液就随流动相进入色谱柱。

　　8、数据监测与分析：

　　通过软件监视各项读数，当检测器检测到样品所有峰值，停止运行并设置新的进样。在下一个样品分析前，建议留出5-10分钟，待流动相通过色谱柱，以便清洗之前样品的残留物；确认基线稳定后，进行下一次注射。

　　9、结束操作：

　　分析结束后，先关闭检测器，然后关闭泵，最后关闭软件。